纖維蛋白原之凍干

纖維蛋白原的提取先將凍好的血漿從低溫冷柜中取出，在2~4℃下解凍，解凍血漿在2~4℃下靜止2小時(shí)，濾網(wǎng)粗濾后1000rpm離心10分鐘，棄上清留沉淀，計(jì)沉淀體積，加等量的纖原清洗液，在2~4℃條件下，1000rpm離心10分鐘，棄上清，留沉淀，計(jì)沉淀體積，沉淀主要成分即為纖維蛋白原。凍干溶液配制過(guò)程中，凍干保護(hù)劑選用蔗糖、甘氨酸或甘露醇的單元、雙元或多元組合。蔗糖是一種抗凍劑，在凍干過(guò)程中可有效地保護(hù)組織或蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)免受冰晶的損傷；而且其凍干后具有相對(duì)較高的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度，可提高產(chǎn)品貯藏的穩(wěn)定性；甘氨酸和甘露醇是一種填充劑，共晶點(diǎn)溫度相對(duì)較高，可有效地保持樣品凍干過(guò)程中的形狀，減少樣品的的皺縮，提高凍干速率，縮短凍干時(shí)間。凍干溶液凍干過(guò)程，首先將擱板溫度迅速冷卻至-5℃，維持20分鐘后，再迅速降低擱板的溫度至-50℃，等待樣品溫度降至-45℃并維持1小時(shí)后，開(kāi)始進(jìn)入一次干燥過(guò)程；起動(dòng)真空系統(tǒng)，待真空度下降至20Pa后，提升擱板溫度至-10℃，持續(xù)約65小時(shí)后，進(jìn)入二次干燥過(guò)程；提升擱板溫度至+5℃，持續(xù)5小時(shí)后，將擱板溫度提升至35℃，持續(xù)4小時(shí)，結(jié)束干燥過(guò)程，在真空下壓蓋密封，取出等待檢驗(yàn)。